九节茶ISSR反应体系的建立及优化

摘要：

以九节茶叶片提取的基因组DNA为材料,对影响ISSR-PCR扩增效果的一些因素,诸如dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶用量、引物用量、模板DNA用量、退火温度以及循环次数等指标进行筛选和优化.结果表明:20 μL ISSR反应体系含10×PCR Buffer、0.4 mmol·L-1 dNTPs、2 U Taq DNA聚合酶、0.6 μmol·μL-1引物、5 ng模板DNA;PCR扩增程序为:94 ℃预变性2 min,94 ℃变性30 s,44.8 ℃退火30 s,72 ℃延伸1 min,35个循环,最后于72 ℃延伸7 min,置4 ℃保存.应用该ISSR体系对10份九节茶种质进行了扩增,证实了该体系的适用性和稳定性.

关键词：九节茶、ISSR、反应体系、优化

所属期刊栏目：38

分类号：S567.1+9(经济作物)

资助基金：福建省科技厅重大资助项目2004YZ02-05;福建省中药材GAP工程技术研究中心资助项目2008Y2001

在线出版日期：2009-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：139-143