枫香ISSR-PCR扩增条件的优化

摘要：

对浙江省天台山枫香自然种群的DNA进行提取和ISSR-PCR扩增条件的优化.分析了Mg2+浓度、4×dNTP浓度、BSA浓度、模板DNA用量、引物用量、Taq DNA聚合酶用量等对反应结果的影响.建立了适用于枫香ISSR分析最适宜的反应体系:10 μl PCR反应体积中,1 × Taq酶配套缓冲液(10 mmol·L-1 Tris-HCl,pH值9.0,50 mmol·L-1 KCl,0.1%TritonX-100),2.0 mmol·L-1 Mg2+,0.15 mmol·L-1 4×dNTP,2 mg·mL-1 BSA,10 ng模板DNA,6 pmol引物,0.9 U Taq DNA聚合酶,引物UBC808的最适退火温度为52.4℃.用此反应体系对天台山枫香自然种群进行了遗传多样性分析,结果显示其多态位点百分率为84.26%,Nei指数为0.2665,Shannon信息指数为0.4044,其遗传多样性处于较高水平.

关键词：枫香、ISSR、优化、遗传多样性

所属期刊栏目：35

分类号：Q943(植物学)

资助基金：浙江省自然科学基金 Y504220

在线出版日期：2008-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：85-89