无患子基因组DNA提取及ISSR-PCR反应体系的建立与优化

摘要：

应用改良CTAB法提取了无患子基因组DNA,该方法具有操作过程简单、耗时少、能有效降低无患子基因组DNA提取过程中酚类化合物、多糖等杂质的污染.正交试验研究了dNTP浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶这3个因素对ISSR-PCR反应的影响,建立并优化了适合于无患子ISSR-PCR的反应体系.优化的反应总体系20μl含1 ×PCR Buffer,0.4 mmol· L-1 dNTP,0.8μmol· L-1引物,0.75 U Taq DNA聚合酶,20 ng DNA模板.使用此ISSR扩增反应体系,获得了部分不同种质无患子DNA的清晰条带,验证了该体系的稳定性.优化的反应体系为后续无患子遗传多样性的研究奠定了基础.

关键词：无患子、ISSR、正交优化、PCR反应体系

分类号：TQ4;R28

资助基金：福建省农科院导师制青年科技创新基金项目2012DQB-26;福建省农业科学院科技下乡"双百"行动项目sbmx1301

在线出版日期：2013-09-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：19-23