人参皂苷Rg3对人胰腺癌细胞Pim-3及Bad凋亡蛋白表达的影响

摘要：

背景与目的:人参皂苷Rg3是一种抗肿瘤中药单体,有研究表明人参皂苷Rg3对肝癌、肺癌、结肠癌、胰腺癌等肿瘤细胞的浸润具有明显抑制作用.本实验目的是研究人参皂苷Rg3对人胰腺癌细胞株PANC-1中原癌基因Pim-3及磷酸化Bad蛋白pBad(Ser112)、Bad(Ser136)表达的影响.方法:用浓度为0、10、20、40和80 μmol/L的人参皂苷Rg3处理PANC-1细胞24 h后,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测人参皂苷Rg3对PANC-1细胞增殖的抑制作用;用倒置显微镜和流式细胞术观察人参皂苷Rg3对PANC-1细胞凋亡的诱导作用;用Western blot法检测经不同浓度人参皂苷Rg3处理后的PANC-1细胞中pim-3、Bad、pBad(Ser112)和pBad(Ser136)的表达;定向克隆Pim-3的发夹状寡核苷酸(short hairpin RNA,shRNA)到真核表达载体形成重组质粒pSilencer 3.1-HI Neo-Pim-3 shRNA.将重组质粒通过脂质体介导转染PANC-1细胞.采用Annexin V/PI流式细胞分析法榆测转染后PANC-1细胞的凋亡,用Westernblot法检测转染后PANC-1细胞的pim-3及pBad(Ser112)的表达.结果:10、20、40和80 μmol/L的人参皂苷Rg3对PANC-1细胞增殖的抑制率分别为20.2%、33.4%、52.8%、65.3%;经10～80 μmol/L的人参皂苷Rg3处理后PANC-1细胞旱现明显的凋亡形态学改变.80 μmol/L人参皂苷Rg3处理PANC-1细胞24 h后,与正常对照组细胞凋亡率(3.3±2.1)%比较,处理组细胞凋亡率(12.2±1.3)%增加(P<0.05);人参皂苷Rg3处理PANC-1细胞24 h后.Bad总蛋白表达没有明显变化.pim-3和pBad(Ser112)的表达均随人参皂苷Rg3浓度的增加而逐渐减弱.PANC-1细胞中pBad(Ser136)不表达;Pim-3 shRNA转染PANC-1细胞后,与正常对照组比较,转染组早期凋亡率和总凋亡率均增加[(11.5±3.7)%vs.(5.8±2.2)%,P<0.01;(20.8±2.6)%vs.(13.0±4.1)%,P<0.05],转染组pim-3及pBad(Ser112)表达均低于正常对照组.结论:人参皂苷Rg3可下调胰腺癌细胞PANC-1中Pim-3以及磷酸化Bad蛋白的表达,从而抑制PANC-1细胞增殖,诱导细胞凋亡.

关键词：人参皂苷Rg3、Pim-3基因、凋亡、PANC-1细胞、胰腺肿瘤

所属期刊栏目：28

分类号：R734.2(肿瘤学)

在线出版日期：2013-09-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：461-465