10.3321/j.issn:1000-467X.2009.04.008
突变型CD59蛋白对卵巢癌细胞的抑瘤效应
背景与目的:国外报道已在多种实体肿瘤细胞中发现有CD59分子的过表达,并与肿瘤的失控性生长和恶性转化密切相关.本研究探讨突变型CD59在卵巢癌细胞A2780表面的抗补体活性以及与LPS联合抑制A2780细胞增殖的活性.方法:取突变型CD59质粒、野生型CD59质粒分别转染A2780细胞,G418筛选稳定表达细胞克隆,并从基因水平和蛋白水平鉴定CD59突变基因和野生型基因的转染情况.MTT法观察野生型CD59与突变型CD59在A2780细胞表面的抗补体活性,以及突变型CD59在LPS存在时对细胞的抑瘤效应.结果:通过荧光免疫检测、流式细胞术分析、RT-PCR鉴定证明建立了稳定转染野生型和突变型CD59的A2780细胞.MTT结果显示,与野生型CD59相比,突变型CD59失去对补体的抑制功能,与对照组未转染的A2780细胞相比无显著性差异.MTT检测5μg/mL LPS作用30 min.对转染野生型CD59、突变型CD59及未转染A2780细胞的增殖抑制率分别为(26.9±2.95)%、(36.3±4.87)%、(29.6±3.16)%,差异有统计学意义(P<0.05).结论:CD59的W40位点对其功能具有重要作用,封闭该位点能够提高补体溶细胞作用.并有助于LPS发挥抑制瘤细胞增殖活性,有望应用于肿瘤治疗.
CD59、补体、基因突变、A2780细胞、卵巢肿瘤
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R392.12
国家自然科学基金项目No.30170893 Grant:National Natural Seience Foundation of China30170893
2013-09-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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