慢病毒载体介导SHIP基因抑制K562细胞增殖及对P13K/Akt信号通路的调控

摘要：

背景与目的:SHIP基因主要表达于造血细胞,通过降解PIP3抑制P13K/Akt信号通路而在造血细胞增殖和存活中起重要负调控作用.本研究通过慢病毒载体介导SHIP基因转染K562细胞,探讨SHIP基因改变及功能丢失与白血病发病的关系.方法:将携带SHIP基因的慢病毒感染K562细胞.FQ-PCR法检测SHIP转录水平,Western blot法检测转染后SHIP蛋白表达及Akt磷酸化水平的变化;比较SHIP基因表达前后细胞增殖、形态的变化.结果:K562细胞中SHIP蛋白阴性.以携带SHIP基因的慢病毒载体转染K562细胞后.细胞增殖抑制率升高.K562一wtSHIP-FIV-G细胞的增殖抑制率由转染第3天的(9.9±1.5)%升到第5天的(40.6±2.3)%;伴有Akt磷酸化水平明显减弱;转染后.K562-wtSHIP-FIV-G组细胞p-Akt的表达水平由0.533降低到0.245(P<0.01),细胞增殖明显被抑制.此外,SHIP蛋白还能使K562细胞出现凋亡特征,Hoechst33342染色结果转染wtSHIP基因组K562细胞第5天早期凋亡率[(38.3±4.3)%]明显高于K562-FIV-G组细胞[(8.2±0.9)%]和未转染组K562细胞[(7.7±0.8)%].结论:SHIP基因具有重要的抑制细胞增殖和促进凋亡的能力.SHIP基因缺失导致K562细胞P13K/Akt信号途径失调.促进K562细胞增殖.

关键词：基因、肌醇5’磷酸酶、慢病毒载体、细胞增殖、磷酸化蛋白激酶B、细胞凋亡

所属期刊栏目：28

分类号：R733.7;R730.23(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30240011;河北省自然科学基金资助项目No.2007000858 Grants:National Natural Science Foundation of China30240011;Natural Science Foundation of Hebei Province2007000858

在线出版日期：2013-09-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：366-372