LRIG3基因沉默对神经胶质瘤细胞系GL15增殖及PCNA和Ki-67表达的影响

摘要：

背景与目的:富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白3(leucine-rich repeats and immunoglobin-like domains 3,LRIG3)是LRIG基因家族成员之一,在多种肿瘤中均有表达下调,但其作用尚不明了.本研究旨在探讨RNA干扰沉默LRIG3基因表达对神经胶质瘤细胞系GL15增殖及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen.PCNA)和Ki-67表达的影响及其机制.方法:用携带U6启动子和LRIG3特异性短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)序列的质粒载体pGenesi12-LRIG3-shRNA1、pGenesi12-LRIG3-shRNA2及含非特异性shRNA编码序列的对照质粒pGenesi12-negative shRNA(neg)转染胶质瘤细胞系GL15,G418筛选出稳定株,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测LRIG3表达的改变,应用噻唑蓝(MTY)法检测稳定转染后对GL15细胞增殖的影响.应用免疫组化SABC法检测对照组和实验组GL15细胞中PCNA和Ki-67的表达.结果:shRNA1及shRNA2组细胞LRIG3 mRNA水平与对照组相比分别下降了52.4%和63.8%,LRIG3蛋白水平分别下降了50.9%和67.4%.MTY结果显示实验组细胞增殖率高于对照组.对照组细胞PCNA阳性率为(35.40+5.69)%,shRNA1及shRNA2组细胞PcNA阳性率分别为(72.13±5.64)%和(81.93±5.23)%,差异均有统计学意义(P＜0.01).Ki-67阳性率在对照组细胞为(49.73±5.73)%,shRNA1及shRNA2组细胞分别为(82.27+5.50)%和(88.67±3.52)%,差异均有统计学意义(P＜0.01).Ki-67表达与PcNA表达呈正相关(r=0.932,P＜0.001).结论:下调LRIG3基因表达可促进胶质瘤细胞的增殖.

关键词：神经胶质瘤、GL15细胞、LRIG3、增殖细胞核抗原、Ki-67核抗原

所属期刊栏目：28

分类号：R735(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金项目30500521

在线出版日期：2013-09-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

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