RNA干扰HIF-1α表达对白血病K562细胞高三尖杉酯碱敏感性的影响

摘要：

背景与目的:缺氧诱导因子-1α(1aypoxia-indueible factor-lα, HIF-1α)是细胞对缺氧应答的一个重要的转录因子,目前对缺氧条件下血液系统恶性肿瘤,尤其是白血病生物学改变的研究相对较少.本研究探讨应用RNA干扰技术抑制HIF-1α在慢性粒细胞白血病细胞系K562中的表达后,细胞对化疗药物高三尖杉酯碱(homoharringtonine, HHT)敏感性的变化.方法:利用shRNA表达载pSilencer 2.1-U6 hygro构建RNA干扰载体,在K562细胞中抑制HIF-1α的表达,潮霉素筛选获得阳性克隆.应用实时定量RT-PCR技术研究缺氧(1% O2分压)条件下,抑制HIF-1α的表达对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、磷酸甘油酸激酶(phosphoglycerate kinase, PGK)、葡萄糖转运蛋白-1(glucose transporter-1,Glut-1)和P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)表达的影响.应用MTT比色法观察抑制HIF-1α表达后,K562细胞对HHT敏感性的变化.结果:转染后HIF-1α在mRNA和蛋白水平的表达均被抑制,缺氧条件下HIF-1α的靶基因VEGF、PGK、Glut-l、P-gp等表达明显下调.HIF-1α被干扰后的K562细胞对HHT的敏感性增加.结论:抑制K562细胞的HIF-1α表达可以抑制血管生成和糖代谢相关基因表达,并且增加对HHT的敏感性.

关键词：RNA干扰、缺氧诱导因子-1α、K562细胞、靶基因、高三尖杉酯碱

所属期刊栏目：27

分类号：R733.3(肿瘤学)

资助基金：国防科工委国防预研基金资助项目KC120705

在线出版日期：2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：723-728