Mer在Jurkat细胞中的表达和抗凋亡作用

摘要：

背景与目的:Mer是Axl受体酪氨酸激酶家族中的一员,其配体Gas6和Mer结合后可以激活Mer的酪氨酸激酶活性以及下游信号转导途径,在细胞炎症、凋亡等方面发挥作用.近年来对于Mer及其家族成员功能的研究不断完善,但关于其在恶性疾病方面的研究报道甚少.本实验探讨Mer在恶性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat中的表达及其对Jurkat细胞凋亡过程的影响,并对其抗凋亡机制进行初步探究.方法:利用流式细胞仪分别检测正常外周血、骨髓中T淋巴细胞以及Jurkat细胞中Mer的表达.利用RNAi技术敲除Jurkat细胞中Mer的表达后采用噻唑蓝(MTT)法检测Mer对于Jurkat细胞增殖的影响,Annexin V/PI双染流式细胞术检测Mer对于Jurkat细胞血清撤离诱导凋亡过程的影响.最后利用荧光定量PCR检测RNA干扰后凋亡相关基因Bcl-2和Caspase-3以探讨Mer在Jurkat细胞中抗凋亡机制.结果:Mer在正常外周血和骨髓的T细胞中均未见表达,而在Jurkat细胞中高表达(51.1%).特异性的siRNA(第1403位点)可以抑制86.0%Mer在Jurkat细胞中的表达.在血清撤离48 h导致的凋亡实验中正常Jurkat细胞仅有1.5%的凋亡率,而敲除Mer后的Jurkat细胞凋亡率达到15.3%,而MTT增殖实验中阻断Mer前后差异无统计学意义(p＞0.05).定量PCR结果显示敲除Mer基因后Jurkat细胞中Bcl-2明显下调,为对照组的42.7%,而Caspase-3变化不显著.结论:Mer在Jurkat细胞中异常高表达,并可能通过Bel-2途径影响细胞凋亡过程.

关键词：Mer、受体酪氨酸激酶、白血病、Jurkat细胞、凋亡、Bcl-2

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分类号：R733.7;R73-3(肿瘤学)

资助基金：江苏省卫生厅135重点学科开放课题135XY0603;苏州大学欧莱雅医学发展基金EEt22522;苏州大学优秀博士论文资助项目23320624

在线出版日期：2007-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：698-702