全反式维甲酸和1α,25二羟维生素D3对肝癌细胞HepG2生长的协同抑制作用

摘要：

背景与目的:全反式维甲酸(all-trans tinoic acid,ATRA)和1α,25二羟维生素D3[1 alpha,25-dihydroxy vitamin D3,1,25(OH)2D3]已被证实能诱导肿瘤细胞分化,并用于造血系统肿瘤的治疗,但其对实体瘤的影响研究较少.本研究旨在通过单独和联合使用ATRA和1,25(OH)2D3,观察其对肝癌HepG2细胞生长和细胞周期的影响,并探讨其相关机制.方法:HepG2细胞经过不同浓度的ATRA和1,25(OH)2D3单独或联合用药处理后,用MTT法检测细胞抑制率、显微镜观察细胞形态的改变、流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡的变化,同时分别用逆转录多聚酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)及流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测细胞周期负调节基因p21WAF1/CIP1和p27KIP1的mRNA及蛋白的表达情况.结果:单独使用ATRA或1,25(OH)2D3和联合用药的HepG2细胞生长均受到抑制,并呈浓度和时间依赖关系,其中联合用药组抑制率明显高于单独用药组(P＜0.05).经10nmol/L 1,25(OH)2D3及联合用药诱导72 h的HepG2细胞G1期细胞占(54.27±3.69)%和(65.64±5.65)%,与对照组[(40.40±1.91)%]相比明显增高(P＜0.05),而1 μmol/LATRA组的细胞周期与对照组相比无明显差异(P＞O.05);同时各实验组均有细胞凋亡产生(P＜0.05),并以联合用药组最为显著.RT-PCR显示10 nmol/L 1,25(OH)2D3和联合用药处理HepG2细胞24 h,p21WAFI/CIP1 mRNA表达与对照组相比分别增高35%和56%;FCM显示两组细胞的P21WAF1/CIP1和P27KIP1的蛋白表达与对照组相比明显增高(P＜0.05),联合用药组更为显著,但经1 μmol/L ATRA诱导的细胞P21WAF1/CIP1和P27KIP1的蛋白表达未见明显改变.结论:ATRA和1,25(OH)2D3均能够抑制HepG2细胞生长,诱导细胞凋亡,1,25(OH)2D3对细胞周期的影响作用是使细胞阻滞在G.期,其作用机制可能与其上调p21WAF1/CIP1和P27KIP1蛋白的表达有关,当与ATRA联合用药时,能够对HepG2细胞生长产生协同抑制作用.

关键词：ATRA、1、25(OH)2D3、肝肿瘤、HepG2细胞、细胞周期、凋亡、p21WAF1/CIP1、p27KIP1

所属期刊栏目：25

分类号：R73-36+1(肿瘤学)

资助基金：教育部留学回国人员科研启动基金6823001004

在线出版日期：2007-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1470-1476