10.3969/j.issn.1000-467X.2006.10.002
人T细胞白血病细胞株Jurkat的TCR基因重排
背景与目的:近年的一些体外实验研究发现,重组激活基因(recombination activating gene)编码的RAG1与RAG2(recombination activating genes,RAGs)蛋白能够介导DNA链的转位(transposition)作用,因而,可能与淋巴系统肿瘤性疾病的发生有关,但迄今尚未有明确定论.我们在实验中发现,代表T细胞发育成熟阶段的人白血病细胞株Jurkat同时表达重组激活基因RAG1和RAG2,并且经适当诱导后有RAGs表达的变化.本研究旨在确证Jurkat细胞是否发生RAGs介导的T细胞受体(T-cell receptor,TCR)基因重排.方法:采用巢式和半巢式PCR检测T细胞受体Dβ-Jβ之间的信号结合T细胞受体删除DNA环(signal joint T-cellreceptor excision DNA circles,sjTRECs);连接介导的PCR(LM-PCR)法检测TCR β链位点重排中间物-重组信号序列(recombination signal sequence,RSS)断点;RT-PCR法检测V(D)J重排第二阶段非同源末端连接(non-homologous end joining,NHEJ)途径中的核心蛋白Ku70/Ku80及末端脱氧核苷酸转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase,TdT).结果:在Jurkat细胞DNA中检测到结合区具有多样性特征的TCR Dβ2-Jβ2 sjTRECs和RSS 5'端和3'端断裂点,并检测到TdT、Ku70/Ku80的表达.结论:Jurkat细胞有TCR基因重排的发生.Jurkat细胞可能成为研究RAGs和TCR基因重排与T细胞淋巴瘤的一个潜在的细胞模型.
白血病、Jurkat细胞、重组激活基因、TCR基因重排
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R338(人体生理学)
国家重点基础研究发展计划973计划2001CB510008
2006-11-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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