重组人TNF-α诱导乳腺癌细胞ZR75-1凋亡及其机制的初步研究

摘要：

背景与目的:肿瘤坏死因子α(TNF-α)是抗肿瘤活性较强的细胞因子,是重要的抗肿瘤生物治疗制剂之一,但由于其对人体有较严重的副作用,临床应用受到了限制.为了降低其毒副作用,同时保留其抗肿瘤能力,TNF-α的突变体--突变型471TNF-α应运而生.本研究对重组人突变型471rhTNF-α与野生型rhTNF-α蛋白的抗肿瘤能力进行了比较,并对突变型471rhTNF-α诱导ZR75-1细胞发生凋亡的作用机制进行初步研究.方法:以乳腺癌细胞系ZR75-1为靶细胞,以基因组DNA琼脂糖凝胶电泳及流式细胞技术分析100 μg/L突变体471rhTNF-α与1001μg/L野生型rhTNF-α作用ZR75-1细胞12 h,肿瘤细胞发生凋亡的情况;利用以ELISA为基础的TransAMTM NF-κBp65试剂盒检测10 μg/L、50μg/L和100 μg/L突变体471rhTNF-α或野生型rhTNF-α作用ZR75-1细胞4 h后核因子NF-κB的活化情况.结果:2%琼脂糖凝胶电泳显示,突变体471rhTNF-α处理组的ZR75-1细胞基因组DNA呈现明显的"ladder"'状分布,野生型rhTNF-α处理组的"ladder"条带明显减弱;流式细胞仪分析显示,突变型471rhTNF-α诱导的凋亡峰面积为(44.6±3.6)%,野生型rhTNF-α诱导凋亡峰面积占(24.7±2.7)%,两组差异具有显著性(P＜0.05);从细胞周期结果来看,突变型471rhTNF-α处理组G1期细胞占(66.6±4.2)%,比例明显高于对照组[(34.8±3.1)%]与野生型hTNF-α[(46.2±3.8)%],S期细胞占(33.2±2.9)%,比例明显低于对照组[(50.1±3.8)%]与野生型hTNF-α处理组[(45.7±2.9)%],G2期细胞比例为(0.2±0.1)%,明显低于对照组[(15.1±2.2)%]和野生型hTNF-α处理组[(8.1±3.1)%],而野生型hTNF-α处理组与对照组相比均无明显变化(P＞0.05).NF-κB活化检测结果显示-50 μg/L野生型rhTNF-α处理ZR75-1细胞4 h后NF-κB的活化量(A值为3.27±0.1)明显高于突变型471rhTNF-α处理组(A值为1.51±0.2).结论:突变型471rhTNF-α比野生型rhTNF-α具有更强的诱导ZR75-1细胞凋亡的能力;ZR75-1细胞内NF-κB活化明显受限是突变型471rhTNF-α诱导凋亡能力增强的主要原因之一.

关键词：乳腺肿瘤、ZR75-1细胞、突变型471rhTNF-α、核因子NF-κB、凋亡、生物治疗

所属期刊栏目：25

分类号：R737.9(肿瘤学)

在线出版日期：2006-06-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：560-565