壳聚糖作为基因治疗载体的可行性研究

摘要：

背景与目的:壳聚糖作为非病毒性基因载体因其带有阳离子特性,近来受到广泛关注.本课题研究壳聚糖-pDNA微粒性质及转染活性,以探讨其作为基因载体的可行性,为今后进一步研究提供依据.方法:质粒DNA通过转化带有目的基因感受态大肠杆菌JM109扩增,按Qiagen公司操作说明提取质粒DNA;复凝聚法制备壳聚糖-pDNA微粒;透射电镜测定壳聚糖-pDNA微粒形态、粒径;紫外分光光度计测定其负载力、负载率及释药实验;凝胶电泳阻滞实验分析pDNA在微粒中位置;体外基因转染实验评价壳聚糖转染活性.结果:壳聚糖-pDNA微粒多呈球形,直径为100～200 nm,平均(138±43)nm,其负载力及负载率分别为(46.8±9.0)%和100%;凝胶电泳阻滞实验证明pDNA被完全包裹在壳聚糖-pDNA微粒内部;壳聚糖-pDNA微粒通过突释和缓释两个过程释放pDNA;壳聚糖能有效转染pEGFP基因并使之表达.结论:壳聚糖能有效转染DNA进入哺乳细胞中,能持续释放DNA并使之稳定表达.因此壳聚糖是一种有效的基因治疗载体.

关键词：基因转染、载体、壳聚糖、微粒

所属期刊栏目：24

分类号：R.331

在线出版日期：2005-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1408-1411