细胞周期检测点的流式细胞术分析

摘要：

背景与目的:真核细胞的细胞周期运行遵循着严格的时相次序,这种精密的延缓和强制的次序,由细胞监控机制--检测点来完成,检测点功能的丧失会导致肿瘤的发生.传统的细胞周期检测点分析多数基于群体细胞DNA直方图的流式细胞术.本研究以晚G1期检测点为模式,建立-种新的细胞周期检测点分析方法--Cyclins/DNA双参数流式细胞术,并评价应用该方法进行细胞周期检测点分析的可行性和优越性.方法:将紫外线照射诱导后的人类急性淋巴细胞型白血病细胞株(MOLT-4)于不同时间点收获固定,分两组进行流式细胞仪检测:一组用DNA直方图法,Modifit软件分析计算G0/G1期细胞总数;另一组应用Cyclin E/DNA双参数流式细胞术对G1晚期细胞Cyclin E的荧光强度、阈值及G0/G1各亚期细胞数量进行定量分析,并比较两组实验结果.结果:用DNA直方图法观察到紫外线照射后0～4 h G0/G1期细胞总数基本不变(5 300～5 500),6 h后开始上升(6 241,12.6%).而用Cyclin E/DNA双参数法观察到:(1)G1晚期细胞的Cyclin E荧光强度于照射后短时间内便开始变化,1 h上升为341.2(对照295.1,15.6%),6 h上升为577.6(95.7%),此时Cyclin E阈值上升到5.4(0 h为2.0);(2)G0/G1各亚期细胞数目变化趋势不明显:G1晚期细胞数6 h时略为减少(此时凋亡率为5.61%),G1早期细胞数缓慢上升.结论:Cyclin E/DNA双参数流式细胞术将Cyclin E的荧光强度及表达阈值定量化,对于细胞晚G1期检测点的检测比传统的DNA直方图法更为敏感和精确.

关键词：白血病/遗传学、流式细胞术、MOLT-4细胞株、细胞周期、细胞周期检测点、细胞周期素

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分类号：R73.3(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金39730270,39670365;国家自然科学基金39725027;国家重点基础研究发展计划973计划G1998051212;卫生部临床学科重点项目20012537

在线出版日期：2005-10-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1151-1155