半乳糖受体介导的c-myc反义寡核苷酸对人肝癌细胞的靶向投递作用
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10.3969/j.issn.1000-467X.2004.11.011

半乳糖受体介导的c-myc反义寡核苷酸对人肝癌细胞的靶向投递作用

引用
背景与目的: c-myc反义寡核苷酸 (antisensE-oligodeoxynucleotide, ASODN)能抑制肝癌细胞的增殖,脂质体和腺病毒介导的 c-myc-ASODN投递虽能显著抑制肝癌细胞的增殖,抑制荷肝癌小鼠肿瘤的生长,但这种投递缺乏靶向性;受体介导的药物投递具有高效性和靶向性的特点,已被用于基因及 ASODN的靶向投递.本实验以半乳糖( galactose, Gal)-聚乙烯亚胺( polyethyleneimine, PEI)作为载体,介导 c-myc ASODN作用于人肝癌细胞 Bel-7402,探讨 c-myc ASODN对 Bel-7402细胞的靶向投递作用.方法:用流式细胞仪检测 Bel-7402、 U937细胞对荧光标记的 Gal-PEI-c-myc-ASODN(简称 Gal-PEI-ASODN)的摄取率及细胞内平均荧光强度;相差 /荧光显微镜观察荧光标记的 Gal-PEI-ASODN及 c-myc-ASODN进入 Bel-7402、 U937、 Raji细胞的形态;台盼蓝拒染法检测不同浓度 Gal-PEI-ASODN对这三种细胞增殖的影响.结果:荧光标记的 Gal-PEI-ASODN或 ASODN与相应细胞孵育 10 min 到 4 h, Gal-PEI-ASODN-Bel-7402细胞的荧光摄取率为 88.25%~ 98.66%,细胞内平均荧光强度为 38.64%~ 111.90%,与单纯 c-myc ASODN-Bel-7402细胞组、 Gal-PEI-ASODN-U937细胞组相比,所有时间点的细胞荧光摄取率、胞内平均荧光强度均显著增高,经 Poission分布检验,均有显著性差异( P< 0.01).相差 /荧光显微镜观察到相同浓度的荧光标记的 Gal-PEI-ASODN能有效进入 Bel-7402细胞,不能有效进入 U937、 Raji细胞,同样浓度的荧光标记的 c-myc ASODN不能有效地进入 Bel-7402细胞;不同浓度的 Gal-PEI-ASODN(含 c-myc ASODN 0.25~ 1.25 μ mol/L)与 Bel-7402细胞作用 48 h后,均能显著抑制该细胞的增殖( P< 0.01);而相同浓度的 Gal-PEI-ASODN(含 ASODN 0.25~ 1.25 μ mol/L)对 U937、 Raji细胞的增殖则无抑制作用 (P >0.05).结论: Gal-PEI-ASODN对 Bel-7402细胞有靶向投递作用,能有效增加细胞内反义寡核苷酸的浓度,而对 U937细胞、 Raji细胞无靶向投递作用.

c-myc、反义寡核苷酸、肝癌、受体、半乳糖

23

R73-36(肿瘤学)

广东省自然科学基金021195;广东省广州市科技攻关项目2001-2-037-01

2004-12-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

1288-1293

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