10.3969/j.issn.1000-467X.2004.04.006
人鼻咽癌顺铂耐药细胞系 (CNE2/DDP)及其亲代细胞 (CNE2)的比较基因组杂交研究
背景与目的:比较基因组杂交 (comparative genomic hybridization,CGH)是一种在荧光原位杂交 (FISH)技术上发展起来的,用于检测两个基因组间相对 DNA拷贝数的改变(缺失或扩增),并将这些变化在染色体上进行定位的分子细胞遗传学方法.为全面了解鼻咽癌耐药细胞与药物敏感细胞在基因组 DNA水平上可能存在的差异,以及这种差异在肿瘤耐药性产生中的意义,我们用 CGH技术对鼻咽癌耐药细胞系( CNE2/DDP)和其亲代药物敏感细胞( CNE2)的基因组 DNA进行检测和分 析.方法:提取两种癌细胞及正常胎盘组织的基因组 DNA,以随机引物法进行荧光标记( CNE2/DDP和 CNE2 DNA以 Fluorescein-12-dUTP标记,探针显绿色荧光;正常胎盘组织以 Tetramethylrhodamine-5-dUTP标记,探针显红色荧光),将标记的 DNA探针同时与正常淋巴细胞分裂中期染色体进行杂交,杂交信号在荧光显微镜下经 CCD( charge coupled device)摄像装置摄取,并通过荧光数字图像分析系统( quips CGH program)进行数据处理,计算两种荧光的比率并绘制分析图.结果: CNE2细胞存在广泛的染色体改变,主要表现在 1q, 3q, 5p, 6p, 7p, 8q, 9q, 11p, 12q, 19q的扩增和 4q, 12p, 13p, 14p, 15p, 18, 20q, 21p, 22的缺失.从 CNE2诱导的耐药细胞系 CNE2/DDP恒定表现为 8q, 19q的扩增和 8p的缺失,其它的染色体均未发现明显异常的扩增或缺失.将 CNE2/DDP在不含药物的培养基中连续传代培养 1个月后重复 CGH,发现与连续药物处理的 CNE2/DDP结果一致. CNE2/DDP细胞较 CNE2细胞具有更为正常和稳定的染色体组成.结论: CNE2/DDP细胞是在耐药诱导过程中选择出来的单一的耐药细胞克隆.肿瘤细胞耐药的产生主要是一个克隆选择过程,即被诱导产生了耐药的细胞克隆在有药物存在的生存压力下被选择出来.
鼻咽癌、细胞系、耐药、比较基因组杂交
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R739(肿瘤学)
2004-06-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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