8-氯腺苷对HL-60细胞中蛋白酶体活性的抑制作用

摘要：

背景与目的:蛋白酶体是真核细胞中具有多相催化活性的蛋白酶复合体,国外报道,蛋白酶体可作为新靶点来筛选抗肿瘤药物.8-氯腺苷(8-chloroadenosine,8-CA)由本室合成,研究已证实8-CA对肉瘤细胞株S180、肝癌细胞株H22及人胃癌异种移植瘤生长有抑制作用.但8-CA抑制肿瘤生长与蛋白酶体的关系还不清楚.本研究拟探讨8-CA对人早幼粒细胞性白血病细胞HL-60中20S蛋白酶体的三种酶活性(包括糜蛋白酶样活性、胰蛋白酶样活性、多肽-谷氨酰-多肽水解酶活性)的影响.方法:不同浓度的8-CA作用于HL-60细胞24、48、72 h后,提取细胞总蛋白,分别检测总蛋白提取液中20S蛋白酶体的三种酶活性,并采用免疫沉淀法测定纯化蛋白酶体的糜蛋白酶样活性,酶活性均以特异底物被蛋白酶体水解后产生的荧光吸光度表示.结果:0.1 μmol/L 8-CA作用于HL-60细胞48 h,对总蛋白提取液中20S 蛋白酶体的三种酶活性均有显著抑制作用,并且随着8-CA 浓度的增加,其抑制作用逐渐增强.5μmol/L 8-CA作用48 h,对糜蛋白酶样活性、胰蛋白酶样活性、多肽-谷氨酰-多肽水解酶活性抑制率分别为44.96%、54.52%和48.36%;作用72 h,对三种酶活性的抑制率分别为67.53%、70.48%和64.08%.1μmol/L和5μmol/L 8-CA作用48 h,对HL,-60中蛋白酶体的糜蛋白酶样活性抑制率分别为68.14%和92.75%,与对照组相比,差异有显著性(P＜0.01).结论:8-CA对HL-60细胞中20S蛋白酶体的酶活性具有抑制作用,并呈剂量及时间依赖性.

关键词：8-氯腺苷、HL-60细胞、蛋白酶体、免疫沉淀

所属期刊栏目：23

分类号：R73-36(肿瘤学)

资助基金：面向21世纪教育振兴行动计划985计划

在线出版日期：2004-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：155-159