结肠腺癌细胞中eIF-4E调节NF-κB表达及对乙酰肝素酶转录表达和活性的影响

摘要：

背景与目的:近期研究显示,人类肿瘤细胞部分转录因子可能受真核细胞起始因子-4E(eukaryotic initiation factor 4E,eIF-4E)在翻译水平上的调节,此关键转录因子表达水平的变化可从转录水平改变某些恶性相关基因产物的表达.本研究旨在探讨结肠腺癌 LS-174T细胞中 eIF-4E对转录因子 NF-κ B表达和活性的影响, 并观察 NF-κ B活性水平对乙酰肝素酶基因转录的作用.方法:将与 eIF-4E mRNA翻译起始区互补的反义寡核苷酸 (antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)经脂质体包裹后转染人结肠癌细胞 LS-174T,以阻抑 eIF-4E表达.随之使用 Western blot和电泳迁移改变分析 (electrophoretic mobility shift assays,EMSA)方法检测 NF-κ B蛋白表达量及活性水平.通过 RT-PCR、 Western blot方法观察乙酰肝素酶转录水平和蛋白表达量的改变;乙酰肝素酶活力采用特异酶活性检测方法,以放射性标记的硫酸乙酰肝素做为底物,凝胶过滤层析分离酶降解产物来分析.结果:针对 eIF-4E的 20个残基的 ASODN经脂质体转染 LS-174T细胞后, eIF-4E基因表达在转录和翻译水平都受到显著阻滞.eIF-4E基因阻抑表达引起结肠癌 LS-174T细胞 NF-κ B蛋白表达量及其活性的显著下降;此外,转录因子 NF-κ B的下调也导致乙酰肝素酶基因的转录表达下降,并且被转染的肿瘤细胞在乙酰肝素酶的蛋白和活性表达水平上也显著下降.结论:结肠腺癌细胞 LS-174T中 eIF-4E在 NF-κ B的翻译调控中起重要作用.NF-κ B作为调控乙酰肝素酶基因表达的重要转录因子,阻滞其活性将显著降低乙酰肝素酶基因的转录表达,并且其蛋白表达和酶活性水平也随之降低.

关键词：结肠肿瘤、反义、转染、真核细胞起始因子 4E、核因子κB、乙酰肝素酶

所属期刊栏目：22

分类号：R735.3;Q557(肿瘤学)

资助基金：广东省自然科学基金010643;教育部高校骨干教师资助计划

在线出版日期：2003-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1023-1029