反义PTTG真核表达载体对人卵巢癌细胞SK-OV-3恶性表型的抑制作用

摘要：

背景与目的:垂体肿瘤转化基因( pituitary tumor transforming gene,PTTG)是一个新的原癌基因,具有多种促肿瘤生长与转移的作用.目前研究多集中于 PTTG在各种肿瘤组织中的表达及其相关的调控机制,而针对其反义阻断可能性的报道较少.本研究中,我们通过构建携带能够表达全长反义 PTTG mRNA的真核表达载体,观察其对人卵巢癌细胞株 SK-OV-3的反义阻断效应.方法:利用含酶切位点的 PCR引物克隆全长 PTTG,反向插入真核表达载体 pcDNA3.1;用脂质体将重组载体转染 SK-OV-3细胞, G418筛选阳性克隆后, Western blot检测 PTTG蛋白和碱性成纤维细胞生长因子 (basic fibroblast growth factor,bFGF)表达的改变, MTT法检测细胞增殖情况,并利用软琼脂糖集落形成实验观察细胞生物学性状的变化.结果:筛选出稳定表达重组 pcDNA3.1-PTTGas的 SK-OV-3细胞;转染细胞组较未转染细胞组的 PTTG、 bFGF表达分别减少了 61.5%和 52.3%;转染细胞增殖明显增强;转染细胞在软琼脂中的集落形成数( 2.4± 0.8)明显低于未转染组和转染空白质粒对照组( 23.3± 5.7和 21.5± 7.9)(P< 0.01).结论:反义 PTTG真核表达载体作为一种新的工具,为针对 PTTG的肿瘤基因治疗提供了可能性.

关键词：PTTG、反义核酸、卵巢癌

所属期刊栏目：22

分类号：R737.31;R730.53(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金39840009;国家自然科学基金30025017

在线出版日期：2003-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1009-1013