显微切割结合RNA线性扩增技术的应用

摘要：

背景与目的:当对无间质细胞混杂的肿瘤细胞进行选择性分析时,显微切割技术是不可缺少的,然而,从显微切割所得的细胞中获取足够 RNA量相当困难.本文的目的是寻找一特异方法,将鼻咽癌细胞从肿瘤间质细胞中分离出来 ,并对其扩增 ,以备进一步研究.方法:采用显微切割技术从鼻咽癌组织冰冻切片中获取鼻咽癌细胞,提取 RNA并对微量 RNA进行体外转录,然后,用 RT- PCR分别验证扩增 RNA的β-actin和 GADPH基因表达水平.结果:从鼻咽癌组织中获取了 20 000～ 40 000个细胞,抽提 RNA, 扩增后获得了片断大小为 0.5～ 2.5 kb的 RNA, 在β-actin、 GADPH表达完整.结论:显微切割结合 RNA线性扩增技术能成功地获取较为单一的鼻咽癌细胞,扩增后的 RNA完整性较好,能运用于进一步研究中 .

关键词：显微切割、RNA线性扩增、RT-PCR方法、鼻咽肿瘤

所属期刊栏目：21

分类号：R734.2(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金39730200;美国中华医学会资助项目96- 655

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1022-1025