一氧化氮诱导食管癌细胞过表达基因的分离与鉴定

摘要：

背景与目的:在一氧化氮(nitricoxid,NO)对食管癌细胞的诱导作用中,一些基因可能会出现过表达,但究竟哪些基因过表达至今尚不清楚.本研究拟对NO诱导食管癌细胞中的过表达基因进行分离鉴定.方法:以人食管癌细胞系EC109作为驱赶方(driver),以被NO诱导的EC109作为实验方(tester),应用抑制消减杂交(suppression subtractivehybridization,SSH)等技术手段研究NO诱导的食管癌细胞中基因的过表达情况.在获得69个SSH阳性克隆的基础上,通过反向mRNA斑点印迹阵列实验进行过表达基因的筛选,通过Northernblot对过表达基因进行验证,并对过表达基因的表达标志序列(expressedsequencetag,EST)实施序列测定,然后与GenBank进行BLAST同源性比较和序列突变分析.结果:鉴定出了两个线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)编码的基因,即ND4L和ND4,并在ND4L/ND4基因片段(1073611449)上发现了三处点突变(10872T→C,11001A→G,11346A→G).结论:NO可以诱导线粒体DNA编码的ND4L和ND4等基因过表达,这将为深入揭示NO对肿瘤细胞的作用机制提供新的重要线索.

关键词：食管癌、一氧化氮、线粒体DNA编码基因、基因过表达、抑制消减杂交

所属期刊栏目：21

分类号：R735.1;Q343.1(肿瘤学)

资助基金：广东省自然科学基金984068;广东省自然科学基金990799;广东省医药卫生科研项目B1999105

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：610-614