抗 VEGF发夹状核酶基因抑制 VEGF表达及卵巢癌细胞增殖的实验研究

摘要：

背景与目的:研究表明血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在与上皮性卵巢癌有关的血管形成过程中可能发挥着重要作用.目前,核酶策略已成为一种基因治疗的策略,用于阻断肿瘤形成或肿瘤的生长与转移.VEGF在卵巢肿瘤形成中的作用尚不十分清楚.我们试图采用抗 VEGF发夹状核酶基因阻断卵巢癌中 VEGF的自分泌和 /或旁分泌通路,以检测其对卵巢癌细胞增殖的影响.方法:采用脂质体介导的方法将自行设计和构建的抗 VEGF发夹状核酶基因真核表达载体转染人卵巢癌 SKOV3细胞,采用 G418筛选获得阳性克隆 ; RNA斑点杂交检测核酶基因在卵巢癌细胞中的表达 ; 免疫组化、间接免疫荧光染色及流式细胞仪结合免疫荧光检测转染前后卵巢癌细胞中 VEGF表达 ; 通过 MTT、细胞贴壁克隆形成实验、软琼脂克隆形成实验及细胞周期分析观察其对卵巢癌细胞增殖的影响.结果:与 SKOV3细胞相比,转染后的 SKOV3-RZ细胞 VEGF表达明显降低(P< 0.01); 细胞生长减慢,细胞贴壁克隆形成及软琼脂克隆形成率明显降低 [(12.7± 1.4)% 和(9.4± 2.0)% 比(30.1± 1.9)% 和(24.8± 1.5)%,P< 0.001];G1期细胞显著增多(77.6% 比 57.9%,P< 0.01),S期细胞显著减少(17.0% 比 29.9%,P< 0.01). 结论:抗 VEGF发夹状核酶基因可显著抑制卵巢癌细胞 SKOV3增殖 ; 本研究为进一步开展肿瘤血管靶向基因治疗提供了实验依据.

关键词：血管内皮生长因子、发夹状核酶基因、卵巢肿瘤、表达、增殖

所属期刊栏目：21

分类号：R459.9(治疗学)

资助基金：国家自然科学基金39700147

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：39-44