10.3969/j.issn.1000-467X.2001.05.012
乙肝病毒 X基因真核表达载体的构建及表达
目的:探讨 HBV X基因在肝癌发生中的作用,并构建含 X基因真核表达质粒。方法:用 PCR法扩增含 EcoR Ⅰ与 Pst Ⅰ酶切位点的 X基因序列,对 PAS2-1载体及 X基因 PCR产物经双酶切,用连接酶将两者连接并转化到大肠杆菌 JM105,对重组质粒经序列测定,称 PAS2-1X。用乙酸锂转化法将重组质粒转化入酵母菌 AH109,经 Western blot法证实重组质粒在酵母细胞中的表达。结果:已构建的质粒 PAS2-1X经序列测定含有完整的 X基因片段,转入酵母后经 Western blot证实酵母细胞表达 X蛋白。结论: PAS2-1X表达载体是为了解 X基因与 X蛋白的致癌机制而构建,为通过酵母双杂交体系筛选体内与 X蛋白相互作用的 X相关蛋白奠定了基础。
乙肝病毒、X基因、真核表达载体
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R373.2(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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