AnnexinI基因转染对BEP2D细胞生长的影响

摘要：

目的:研究AnnexinI基因cDNA转染对永生化人支气管细胞系BEP2D生长的影响.方法:pT7T3D质粒经NotI和XhoI双酶切获得人AnnexinI基因cDNA片段,亚克隆至真核表达载体pCI-neo,构建人AnnexinI基因真核表达载体pCI-AXI.通过采用脂质体介导转染技术,将AnnexinI的真核表达重组质粒和空载体质粒分别导入永生化人支气管细胞系BEP2D;合成AnnexinI反义寡核苷酸,观察AnnexinI基因对细胞生长的影响.结果:pCI-AXI转染永生化BEP2D细胞后,AnnexinI的表达比永生化BEP2D细胞和空载体转染细胞提高了1.5倍.pCIAXI转染细胞倍增时间为27h,较永生化细胞(37h)、空载体转染细胞(33h)明显缩短,流式细胞仪分析表明,AnnexinI表达升高后促进G0/G1期细胞进入S期和G2/M期.永生化细胞、pCI-neo和pCI-AXI转染三种BEP2D细胞的接种效率分别为49.4%,57.87%,82.53%,pCI-AXI转染细胞形成的集落数明显高于其它两种细胞(P<0.002),并且细胞呈复层生长趋势;pCI-AXI转染细胞在软琼脂中的克隆形成率为0.01%,永生化细胞和空载体转染细胞在软琼脂中不能形成克隆.反义寡核苷酸(50nmol/L)能显著抑制BEP2D细胞的生长(P<0.05).结论:AnnexinI具有促进BEP2D细胞增殖,提高BEP2D细胞生存能力的作用;AnnexinI的这种功能将有助于细胞的转化及肿瘤的发生发展.

关键词：AnnexinI、细胞生长、BEP2D细胞、基因转染

所属期刊栏目：19

分类号：Q344;R730.231(遗传学分支学科)

资助基金：中国博士后科学基金;国家重点基础研究发展计划973计划G1998051208

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：619-622