外源性野生型p53基因对人骨肉瘤细胞株生物学特性的影响

摘要：

目的:研究外源性野生型p53基因对骨肉瘤细胞株生物学特性的影响.方法:采用基因转染技术,将外源性野生型p53基因重组质粒-PM47,导入人骨肉瘤细胞株HOS-8603细胞中,经选择培养基筛选阳性生长细胞克隆,用PCR技术检测PM47在转染后的瘤细胞内的存在情况;在相差显微镜和光镜下对转染前后瘤细胞的形态学进行观察和生长特性进行测定;用凋亡原位检测法检测瘤细胞凋亡率;流式细胞仪测定瘤细胞DNA含量和细胞周期;免疫组化法对转染前后瘤细胞p53、p21/WAF1、bax和bcl-2蛋白的表达进行定性和半定量检测.结果:转染后的瘤细胞形态由转染前密集排列的上皮样细胞转变为排列稀疏的长梭形细胞,瘤细胞生长速度减慢,群体倍增时间比转染前增加了2.3倍,且易出现脱壁并见散在瘤细胞凋亡;流式细胞仪检测发现转染后的瘤细胞多停滞于G1期;免疫组化检测结果发现转染后的瘤细胞p21/WAF1和bax蛋白的表达较强,而bcl-2蛋白表达受到抑制.结论:野生型p53是通过诱导p21/WAF1蛋白的表达和抑制bcl-2的表达从而调节细胞周期发挥抑瘤作用;诱导bax的表达启动细胞凋亡.

关键词：p53、骨肿瘤、细胞周期、生长抑制、细胞凋亡

所属期刊栏目：18

分类号：R738.1(肿瘤学)

资助基金：中国科学院资助项目39470288

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：13-16