10.3969/j.issn.1000-467X.1999.03.017
DNA引物酶抑制剂筛选方法的建立及应用
目的:建立DNA引物酶抑制剂的筛选方法,并应用于大量筛选,找出对DNA引物酶有抑制作用的抗癌药物或先导化合物.方法:以小鼠艾氏腹水癌细胞破碎液为材料,过DE-52和P-11层析柱,提取分离DNA引物酶,用大肠杆菌大片段DNA多聚酶Ⅰ延长引物法检测DNA引物酶的活性.并在此反应液中加入化合物检测对DNA引物酶活性的抑制作用,以激活的小牛胸腺DNA为模板排除化合物对大片断DNA多聚酶Ⅰ的抑制作用.结果:部分纯化的DNA引物酶比活性为8753U/mg,酶的总获得率为22.1%.在100μg/ml浓度下,氯霉素和鞘氨醇对DNA引物酶活性抑制率分另为71.2%±3.7%和83.0%±5.4%.结论:该方法已经建立,大量筛选发现非抗癌药物的氯霉素和鞘氨醇两种化合物对DNA引物酶活性有抑制作用.临床常用的抗癌药物未发现对此酶活性有抑制作用.
DNA引物酶、抑制剂、药物筛选
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R979.1(药品)
中国科学院资助项目39370800;39870886
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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