逆转录病毒载体介导的IL-6大肠癌基因治疗实验研究

摘要：

目的:探讨IL-6转基因表达对大肠癌细胞的体内外抑制作用.方法:参照分子克隆技术将重组逆转录病毒载体pZIPIL-6cDNA转染PA317包装细胞,以G418筛选抗药性细胞,常规制备重组病毒液并感染大肠癌HT-29细胞,采用NorthernBlot分析基因转录水平,ELISA法和MTT显色法检测蛋白表达的量与细胞活性,以细胞生长曲线和集落形成实验以及裸鼠移植瘤实验,观察转导株的体内外抑瘤作用.结果:制备了高滴度的重组病毒液(5.1×105cfu/ml),建立了稳定表达IL-6的转导细胞(HT-29/IL-6),表达的量与活性分别为1132.5pg/ml与150U/ml,转导株的细胞群体倍增时间为2.5天,对数生长期在4～7天之间,集落形成率和抑制率分别为2.21%和50%,接种裸鼠皮下的出瘤时间为13.5天,最终瘤体直径在6.5～8.5mm之间,以上参数与非转导株HT-29细胞相比,均有显著差异.结论:通过逆转录病毒载体的介导,IL-6基因能稳定整合在靶细胞染色体,并进行有效的转录表达,IL-6转基因表达可明显抑制大肠癌细胞的体外增殖和体内移植瘤的形成与发展.

关键词：大肠肿瘤、IL-6、逆转录病毒、基因治疗

所属期刊栏目：18

分类号：R33434(人体生理学)

资助基金：军队攻关项目91A022-0056

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：250-252