特异性脱氧核酶对喉癌真核细胞起始因子4E基因mRNA的体外切割作用

摘要：

目的 研究特异性脱氧核酶(10-23DNAzyme)对喉癌真核细胞起始因子4E(eukaryotic initiation factor-4E,eIF4E)基因mRNA的体外切割作用.方法 设计合成针对原癌基因eIF4EmRNA编码区的1102、1289、1226位点的3个10-23DNAzyme-eIF4E,用内切酶Xhol将含有eIF4E基因mRNA的pGEM7zf+eIF4E质粒消化成线性.以此为模板体外转录出用[α-32P]UTP标记的靶eIF4E基因编码区mRNA.在37℃,pH 7.5,Mg2+离子50 mmol/L条件下,分别与3个10-23DNAzyme-eIF4E(1 μmol/L)混合进行切割反应,并比较不同Mg2+离子浓度下酶对靶mRNA的切割活性.反应产物在8%变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳分离并行放射自显影,应用凝胶成像分析仪评价酶的切割效率.结果 在设定条件下,3个10-23DNAzyme-eIF4E对eIF4E基因mRNA均有切割活性,且随着Mg2+浓度越高,酶的切割活性增强.结论 3个10-23DNAzyme-eIF4E能有效切割eIF4E基因编码区mRNA,且切割效率与Mg2+浓度有关.

关键词：DNA、催化性、真核细胞起始因子4E、基因疗法、喉肿瘤

所属期刊栏目：14

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：吉林大学校科研和教改项目K205

在线出版日期：2008-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：659-661