5-氮杂-2'-脱氧胞苷对人子宫内膜癌JEC细胞生长及形态影响的研究

摘要：

目的:通过DNA甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人子宫内膜样癌JEC细胞(中分化)中p57kip2基因启动子区去甲基化干预,研究5-Aza-CdR对JEC细胞生长抑制及形态改变的影响.方法:Ⅰ.用亚硫酸氢盐测序PCR(BSP)法检测不同浓度5-Aza-CdR干预后JEC细胞中p57kip2基因启动子区甲基化状态.Ⅱ.将实验组分为12.5μmol?L-1组、12.5+μmol?L-1组(48h换液时追加一次5-Aza-CdR),对照组不加任何浓度的5-Aza-CdR:(1)干预24 h、72 h,倒置显微镜下观察各组细胞的生长情况.(2)干预72 h,电镜观察各组细胞的超微结构改变情况.结果:Ⅰ.JEC细胞中p57kip2基因启动子区甲基化水平:未加药组(0μmol?L-1)p57kip2基因启动子区呈高甲基化状态(88.1％),12.5μmol?L-1组总体甲基化率最低(76.2％).Ⅱ.JEC细胞的生长情况及形态改变情况:(1)光镜:对照组JEC细胞呈多角形或不规则形,梁索状、巢团状、小巢状或散在分布,局部形成微腺泡样结构.随着培养时间的延长,细胞密度逐渐增加,微腺泡样结构更加明显.与对照组比较,干预24 h后,两实验组细胞密度均有所减少;干预72 h后,12.5μmol?L-1组细胞密度仅比对照组略有减少,12.5+μmol?L-1组细胞密度比对照组明显稀少.(2)电镜:对照组JEC细胞呈不规则形,表面可见短小的微绒毛;胞质内可见线粒体、粗面内质网、分泌泡、脂滴和自噬溶酶体等结构;胞核不规则形,以常染色质为主,可见篮网状核仁,偶见核分裂像及凋亡的细胞.干预72 h后,两实验组细胞表面微绒毛均较对照组增多,胞质内分泌泡、自噬溶酶体增多,扩张的内质网腔内充满合成的蛋白质,未见线粒体肿胀,12.5+μmol?L-1组比12.5μmol?L-1组的结构改变更明显.结论:5-Aza-CdR可下调人子宫内膜样癌JEC细胞中抑癌基因p57kip2启动子区甲基化水平,从而发挥其抑制JEC细胞生长与增殖的作用,还可使细胞向较好的分化方向转化;浓度为12.5μmol?L-1的5-Aza-CdR对JEC细胞不具备细胞毒性作用,追加用药比单纯一次用药对JEC细胞生长与增殖的抑制的效果更好.

关键词：子宫内膜癌、子宫内膜样癌、5-氮杂-2’-脱氧胞苷、JEC细胞、甲基化、p57kip2

所属期刊栏目：40

分类号：R737.33;Q336(肿瘤学)

资助基金：贵州省科技合作计划资助项目[No.黔科合基础20171216

在线出版日期：2021-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：144-150