10.3969/j.issn.2096-2665.2023.12.038
NLRP3炎症小体对大鼠心肌细胞H9C2钙化的影响
目的 探究核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白 3(NLRP3)炎症小体对大鼠心肌细胞H9C2 钙化的调控作用.方法 采用10 mmol/L的β-甘油磷酸钠培养10 d,诱导心肌细胞钙化模型.具体分组为:空白对照组、钙化模型组、模型+NLRP3抑制剂组.其中模型+NLRP3抑制剂组为造模前采用10 μM NLRP3-IN-2 预处理细胞,并于24 h后再采用β-甘油磷酸钠诱导.采用Von kossa染色观察各组心肌细胞钙化情况;生化试剂盒检测细胞上清中碱性磷酸酶(ALP)活性;流式检测各组细胞凋亡情况;实时荧光定量PCR实验(qPCR)检测各组细胞凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶 1(caspase-1)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、Runt相关转录因子2(Runx2)mRNA的表达情况.结果 与空白对照组相比,模型组可见颗粒状沉积物分布在细胞周围,ALP活性水平显著上升,细胞凋亡水平显著上升,ASC、caspase-1、BMP-2、Runx2 mRNA表达水平显著上升;与模型组相比,模型+NLRP3抑制剂组中细胞钙沉积情况显著减轻,ALP活性水平显著下调,细胞凋亡水平显著下降,ASC、caspase-1、BMP-2、Runx2 mRNA表达水平显著下降.结论 10μM NLRP3-IN-2 可以抑制心肌细胞钙化模型,其作用可能与抑制ASC/Caspase-1 通路、抑制ALP活性、抑制细胞凋亡有关.
NLRP3炎症小体、心肌细胞、细胞钙化、ASC/Caspase-1通路
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R542.2(心脏、血管(循环系)疾病)
江西省卫生健康委员会立项课题202210170
2023-07-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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