10.12122/j.issn.1673-4254.2023.02.19
鹦鹉热衣原体Ⅲ型分泌蛋白SINC通过激活MAPK/ERK信号通路促进宿主细胞自噬
目的 探讨鹦鹉热衣原体(Cps)SINC蛋白对宿主细胞自噬的影响,及MAPK/ERK信号通路在其中的调控作用.方法 用重组的SINC蛋白刺激小鼠单核巨噬细胞(RAW 264.7),Western blot检测LC3-Ⅱ和Beclin-1的水平及ERK1/2的磷酸化程度,并用间接免疫荧光法检测SINC蛋白刺激后细胞LC3的水平,透射电镜检测自噬特殊结构.用50μmol MEK1/2抑制剂U0126预处理RAW 264.7细胞后1 h,再用不同浓度SINC蛋白刺激不同时间,用间接免疫荧光检测LC3的水平,并用Western blot检测LC3-Ⅱ和Beclin-1的表达水平.结果 Western blot检测结果显示,以2μg/mL SINC蛋白刺激RAW 264.7细胞12 h时,LC3-Ⅱ和Beclin-1的表达水平显著上调,并达到峰值;间接免疫荧光检测发现SINC刺激后可使细胞内LC3荧光斑点数明显增多,透射电镜下可见更多的自噬小体和自噬溶酶体.2μg/mL SINC蛋白刺激RAW 264.7细胞15 min时p-ERK1/2/ERK1/2比值明显上调;加入抑制剂U0126后,LC3-Ⅱ和Beclin-1表达下调,LC3-Ⅱ荧光斑点聚集减少.结论 SINC蛋白通过激活MAPK/ERK信号通路促进RAW 264.7细胞发生自噬.
鹦鹉热衣原体、SINC蛋白、自噬、MAPK/ERK通路
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R734.2;R318;S852.65
国家自然科学基金;湖南省自然科学基金项目;湖南省教育厅重点项目
2023-03-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
294-299