ELF4通过激活Akt通路促进胰岛素瘤细胞增殖并抑制细胞凋亡

摘要：

目的 探索ELF4促进胰岛素瘤细胞增殖与抗凋亡的作用及其机理.方法 利用逆转录病毒载体系统,构建稳定高表达ELF4的胰岛素瘤细胞BON-ELF4,以及载体对照组细胞BON-Vector.采用MTT法检测胰岛素瘤细胞BON-ELF4和BON-Vector各组细胞的生长情况.采用0.1μmol/L化疗药物表阿霉素处理BON-ELF4和BON-Vector细胞24 h后,检测细胞凋亡相关指标,采用免疫印迹法检测各组肿瘤细胞中凋亡通路关键因子caspase-9,caspase-8和PARP切割带的表达水平;采用Annexin V-FITC/PI双染色结合流式细胞术分析各组细胞凋亡情况.采用免疫印迹法检测胰岛素瘤细胞BON-ELF4和BON-Vector细胞中Akt磷酸化水平.结果 免疫印迹法检测结果显示,BON-ELF4细胞中ELF4蛋白表达量高于对照组细胞BON-Vector(P=0.013),稳定高表达外源性ELF4蛋白的细胞系BON-ELF4构建成功.稳定高表达ELF4的细胞系BON-ELF4生长明显较快(P<0.05).相比较于载体对照组BON-Vector,BON-ELF4细胞在0.1μmol/L表阿霉素处理24 h后caspase-8,caspase-9的蛋白前体降低,而caspase-8,caspase-9切割成熟体升高(P<0.05);同时,相应的PARP切割带随着ELF4的高表达而降低(P<0.05);流式细胞术检测结果显示,22.90％的载体对照组BON-Vector细胞呈现出Annexin V阳性、PI阴性的早期凋亡结果,6.03％的BON-ELF4细胞组呈现出Annexin V阳性、PI阴性的早期凋亡结果.外源高表达ELF4的肿瘤细胞中Akt的磷酸化显著升高(P<0.05),而Akt总蛋白的水平基本未受影响(P>0.05).结论 ELF4能通过激活Akt通路而促进胰岛素瘤细胞增殖和抗凋亡.

关键词：ELF4;胰岛素瘤细胞;Akt信号通路

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资助基金：广东省自然科学基金2018A030313599,2016A030313239

在线出版日期：2021-10-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1329-1333