大鼠膝骨关节炎模型中高迁移率族蛋白1的高表达机制

摘要：

目的 研究膝骨关节炎病理进程中滑膜成纤维细胞(FLSs)焦亡与其释放高迁移率族蛋白1(HMGB1)的分子机制.方法 在动物实验中,将SD大鼠利用随机数字表法分为2组,6只/组,空白对照组(无任何处理),膝骨关节炎组(膝骨关节炎模型),使用前交叉韧带切断法(ACLT)建立大鼠膝骨关节炎模型,通过HE染色及Mankin'评分观察大鼠膝关节软骨的破坏情况,通过蛋白免疫印迹法检测膝关节滑膜组织中细胞焦亡相关的蛋白和HMGB1蛋白的表达情况.在细胞实验中,将细胞随机分为3组,空白对照组(等量的PBS处理),细胞焦亡组(LPS+ATP处理),小干扰RNA转染组(LPS+ATP+siRNA处理).使用脂多糖+三磷酸腺苷(LPS+ATP)诱导滑膜成纤维细胞发生焦亡,分别使用不同的小干扰RNA抑制滑膜成纤维细胞发生焦亡,使用RT-qPCR验证不同的小干扰RNA抑制NLRP1、NLRP3、ASC和caspase-1的转染效果,通过Western blot检测滑膜成纤维细胞中细胞焦亡相关的蛋白和HMGB1蛋白的表达情况;使用ELISA检测细胞上清中HMGB1的蛋白水平.结果 动物实验中,与空白对照组相比,膝骨关节炎组滑膜组织中焦亡相关的蛋白及HMGB1蛋白表达明显升高(P<0.05),软骨组织Mankin'评分明显升高(P<0.05);细胞实验中,小干扰RNA能够明显抑制NLRP1、NLRP3、ASC和caspase-1的mRNA表达(P<0.05),细胞焦亡组中细胞焦亡相关的蛋白及HMGB1蛋白表达明显高于空白对照组和小干扰RNA转染组(P<0.05),各细胞焦亡组细胞上清中HMGB1的蛋白水平明显高于空白对照组和小干扰RNA转染组(P<0.05).结论 在膝骨关节炎病理进程中,NLRPs炎性小体介导的滑膜成纤维细胞焦亡可促进HMGB1的大量释放,这与细胞焦亡下游因子caspase-1蛋白的活化有关.

关键词：膝骨关节炎;滑膜成纤维细胞;焦亡;高迁移率族蛋白1

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资助基金：国家自然科学基金;江苏省中医药培育项目

在线出版日期：2021-09-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1142-1149