EBV阳性人鼻咽癌细胞外泌体促进淋巴管新生与鼻咽癌淋巴结转移

摘要：

目的 探讨EB病毒(EBV)阳性鼻咽癌细胞外泌体对淋巴管新生与鼻咽癌淋巴结转移的影响.方法 利用超速离心获得细胞外泌体,对外泌体进行Western blot与纳米颗粒追踪分析(NTA)鉴定.利用Dio染料吞噬实验,验证外泌体可以被淋巴管内皮细胞摄取.离体条件下,分别利用等体积培养基以及20μg/mL鼻咽上皮细胞(NP69)、HK1-EBV、C666-1细胞外泌体和除去外泌体的HK1-EBV与C666-1上清蛋白预处理淋巴管内皮细胞,检测淋巴管内皮细胞成管与迁移情况;在体实验,首先建立裸鼠腘窝淋巴结转移模型,负瘤裸鼠被随机分成4组,3只/组.对照组:腘窝处注射生理盐水(30μL);NP69外泌体组:10μg/30μL NP69外泌体;HK1-EBV除去外泌体上清组:10μg/30μL HK1-EBV除去外泌体上清蛋白;HK1-EBV外泌体组:10μg/30μL HK1-EBV外泌体.每2 d注射1次,共4次.结果 超速离心获得外泌体富含外泌体特异性蛋白,同时NTA鉴定表明其粒径范围正常;鼻咽癌细胞与NP69外泌体可以被淋巴管内皮细胞摄取;HK1-EBV与C666-1外泌体较空白对照组与NP69外泌体可显著促进淋巴管内皮细胞成管与迁移(P<0.05),HK1-EBV与C666-1外泌体组与对应除去外泌体上清蛋白组间无显著性差异(P>0.05);腘窝淋巴结转移实验发现:HK1-EBV外泌体较空白对照组、NP69外泌体以及除去外泌体的HK1-EBV上清蛋白可显著促进鼻咽癌细胞淋巴结转移以及局部淋巴管新生(P<0.05).结论 EBV阳性鼻咽癌细胞外泌体能促进鼻咽癌淋巴管新生与淋巴结转移.

关键词：EB病毒、鼻咽癌、外泌体、淋巴结转移、肿瘤微环境、淋巴管新生

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资助基金：广州市基础与应用基础研究项目202002030086

在线出版日期：2021-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1776-1783