血管紧张素Ⅱ通过上调富含半胱氨酸蛋白61表达诱导HEK293T细胞凋亡

摘要：

目的 探讨富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导HEK293细胞功能中的改变及作用.方法 HEK293T细胞于体外培养,并应用CRISPR/Cas9技术敲低HEK293T细胞Cyr61基因.将细胞分为四组:(1)对照组;(2)Cyr61敲低组;(3)AngⅡ组;(4)AngⅡ+Cyr61敲低组,以10-7 mol/L AngⅡ处理细胞,48 h收集细胞用流式细胞仪检测细胞凋亡,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术及蛋白质免疫印迹技术检测细胞Cyr61及Bcl-2的mRNA及蛋白表达量.结果 Cyr61敲低组Cyr61蛋白水平较正常对照组明显下降(P<0.05),AngⅡ干预48 h后Cyr61蛋白和mRNA表达水平显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白和mRNA表达水平明显下降(P<0.05),敲低Cyr61后Bcl-2蛋白和mRNA表达水平明显升高(P<0.05),与对照组凋亡率(11.88±1.46)％相比,Cyr61敲低组凋亡率为(3.87±0.83)％,AngⅡ干预组HEK293T细胞凋亡率为(26.94±3.73)％(P<0.05),与AngⅡ干预组相比,Cyr61敲低+AngⅡ组凋亡率为(15.76±1.31)％(P<0.05).结论 Cyr61表达量的上调与AngⅡ诱导的HEK293T细胞损伤有关,下调Cyr61的表达可以有效地保护AngⅡ诱导的细胞损伤.

关键词：HEK293T细胞、CRISPR/Cas9、Cyr61、AngⅡ、凋亡

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资助基金：广西自然科学基金重点项目2017GXNSFDA198005;广西高校科研重点项目KY2015ZD092;右江民族医学院校级科研课题YY2016KY011;右江民族医学院2016年度第二批广西高校重点实验室开放课题KFKT20160055

在线出版日期：2019-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：810-815