手术切除的结直肠癌组织中的肿瘤干细胞的培养及鉴定

摘要：

目的 获得结直肠癌患者手术切除癌组织的肿瘤干细胞(CSC),培养并鉴定其干细胞特性.方法 通过原代培养手术切除结直肠癌组织获得结直肠癌细胞,再通过有限稀释法和无血清培养法筛选结直肠癌CSC,软琼脂集落实验检测CSC和对照组人结直肠癌细胞株SW480的增殖能力;用低数量级细胞裸鼠皮下成瘤实验,检测结直肠癌CSC和SW480的成瘤能力;并运用Western blot及免疫荧光方法,检测CSC和SW480的免疫表型.结果 临床结直肠癌标本原代培养的CSC,加入血清培养可使CSC分化.软琼脂集落形成实验结果显示,原代培养的CSC克隆形成率为56.64％和54.45％,对照组人结直肠癌细胞株SW480的克隆形成率为4.41％,CSC与SW480集落形成率的差异具有统计学意义(P<0.01).裸鼠皮下成瘤实验中,原代培养的CSC皮下注射500个细胞可形成皮下瘤,而SW480皮下注射500个细胞不形成皮下瘤.CSC表达CD133、CD44,不表达CK7;SW480细胞不表达CD133、CD44,表达CK7.结论 原代培养的手术切除结直肠癌组织标本获得的肿瘤细胞,再行无血清培养可形成CSC,鉴定具有CSC的自我更新及分化能力.

关键词：肿瘤干细胞、结直肠癌、原代培养

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资助基金：国家重点研发计划973项目,2016YFC1201801;国家自然科学基金81702359,81672453;广东省自然科学基金2015A030310089;深圳市科技计划项目JCYJ20180301170035531

在线出版日期：2019-06-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：415-421