10.12122/j.issn.1673-4254.2019.03.05
沉默YAP1可抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力
目的 探究沉默Yes相关蛋白1(YAP1)对鼻咽癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响.方法 采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测YAP1在鼻咽癌细胞系中的表达水平;在鼻咽癌细胞S26和S18中转染3条合成的小干扰RNA:si-NC,si-YAP1#1和si-YAP1#2,以转染阴性对照si-NC的细胞作为对照组,转染si-YAP1#1和si-YAP1#2的细胞作为实验组,实时荧光定量PCR和Western blot检测转染后的干扰效率;通过细胞计数、平板克隆形成等方法评估转染si-YAP1#1和si-YAP1#2后的实验组和转染si-NC的对照组对鼻咽癌细胞增殖能力的影响;用划痕和Transwell方法分析各组细胞迁移与侵袭能力的变化;Western blot检测各组细胞中c-myc、上皮性钙黏蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)等与细胞增殖和上皮间质转化相关蛋白的表达变化.结果 YAP1在鼻咽癌细胞系中高表达;与阴性对照组相比,转染si-YAP1#1和si-YAP1#2的实验组细胞中YAP1的mRNA及蛋白水平均显著降低(P<0.05);生长计数、平板克隆、划痕及Transwell等实验结果均显示转染si-YAP1#1和si-YAP1#2的实验组细胞的生长和克隆能力、划痕愈合能力及侵袭能力较阴性对照组细胞明显下降(P<0.01);且相较阴性对照组,实验组细胞中c-myc、N-cadherin和Vimentin等蛋白的表达水平降低,E-cadherin的表达量增加.结论 YAP1在鼻咽癌细胞系中高表达,在鼻咽癌细胞中利用siRNA靶向敲低YAP1的表达后可以抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力,提示YAP1可以作为一个潜在的鼻咽癌临床治疗干预靶点.
Yes相关蛋白1、鼻咽癌、细胞增殖、细胞迁移、细胞侵袭
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国家自然科学基金青年基金81802719;广东省医学科学技术研究基金A2017433
2019-04-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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