人RhoA发生了SUMO化修饰

摘要：

目的 探讨人RhoA是否发生SUMO化修饰.方法 运用重叠延伸PCR和双酶切连接方法构建pcDNA3-3flag-RhoA真核表达载体,测序验证.将重组RhoA质粒转染进HEK293T细胞中,免疫印迹检测质粒的表达.将重组RhoA质粒分别和SUMO各型质粒共转染进HEK293T细胞中,细胞免疫荧光检测RhoA与SUMO之间是否存在共定位.免疫共沉淀方法检测RhoA是否发生SUMO化修饰.结果 成功构建pcDNA3-3flag-RhoA重组质粒,测序结果提示存在一个同义突变,其余完全正确;免疫印迹检测重组RhoA质粒能高效表达融合蛋白;免疫细胞化学检测到RhoA与SUMO2/3存在共定位,RhoA与SUMO1不存在共定位;免疫共沉淀检测SUMO2/3对RhoA发生修饰作用,SUMO1对RhoA未发生修饰作用.结论 人RhoA发生了SUMO2/3参与的SUMO化修饰,可能参与神经系统损伤后轴突再生的调控.

关键词：RhoA、SUMO化修饰

所属期刊栏目：38

分类号：R3 ;S85

资助基金：国家自然科学基金31371146,81070983 Supported by National Natural Science Foundation of China 31371146, 81070983

在线出版日期：2018-02-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：75-80