绿色荧光蛋白为报导基因快速筛选重组羊痘病毒表达载体

摘要：

目的 利用绿色荧光蛋白(GFP)为报导基因,构建通用、高度减毒的外源基因表达载体IA82△121-V.方法 抽提病毒DNA,扩增ORFV132左右同源臂,构建穿梭质粒pSPV-132LF-EGFP-132RF;转染OFTu细胞,与羊痘病毒IA82△121同源重组,通过荧光信号筛选重组体IA82△121-V,PCR及测序鉴定,并经病毒滴定、体外血管内皮细胞增殖实验以检测ORFV132缺失后的功能变化.结果 成功快速筛选出重组羊痘病毒IA82△121-V,初步判断ORFV1 32的缺失不影响病毒体外的生长复制功能,但是减轻了其毒力.结论 利用GFP为报导基因能简单、快速、稳定地筛选出重组羊痘病毒,高度减毒的重组羊痘病毒IA82△121-V有望成为新一代外源基因表达载体.

关键词：羊痘病毒、绿色荧光蛋白、同源重组

所属期刊栏目：36

分类号：S51;TQ4

资助基金：国家自然科学基金81441066;广东省自然科学基金S2013010014850Supported by National Natural Science Foundation of China81441066

在线出版日期：2016-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：67-72