兔抗弓形虫Ⅰ型液泡型质子焦磷酸酶多克隆抗体的制备及鉴定

摘要：

目的 制备兔抗弓形虫I型液泡型质子焦磷酸酶(TgVP1)多克隆抗体并鉴定其应用.方法 选择弓形虫ME49株TgVP1氨基酸序列中的两条多肽,TgVP1-1与TgVP1-2,进行人工合成,并将其与KLH偶联作为抗原免疫新西兰大耳白兔,收集血清制备多克隆抗体,并通过ELISA、Western blot、免疫荧光等方法进行鉴定.结果 经间接ELISA测定,兔抗TgVP1-1及TgVP1-2的多克隆抗体效价均达1:128 000;Western blot结果显示两种多抗均能识别弓形虫天然蛋白中85 000左右条带,与TgVP1预测相对分子质量大小相符,且特异性较好;通过免疫荧光技术检测到两株多抗识别的蛋白均定位于细胞质中,与酸性钙体的分布相同.结论 采用人工合成多肽为免疫原所获得的兔抗TgVP1多克隆抗体效价高,特异性好,弓形虫TgVP1和酸性钙体的深入研究奠定了基础,同时也为弓形虫病的诊断提供了新的有效工具.

关键词：弓形虫、焦磷酸酶、酸性钙体、多克隆抗体

所属期刊栏目：35

分类号：R3 ;S79

资助基金：国家自然科学基金81171608 Supported by National Natural Science Foundation of China 81171608

在线出版日期：2015-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1137-1142