禽流感病毒H5N1血凝素基因在昆虫细胞中的表达及鉴定

摘要：

目的 应用杆状病毒-昆虫细胞表达体系克隆及表达禽流感病毒H5Nl血凝素H5抗原,鉴定其抗原性和生物活性.方法 PCR扩增禽流感病毒H5全长基因序列,克隆、转化制备重组杆状病毒Bacmid质粒,通过转染昆虫细胞制备重组杆状病毒进行蛋白表达.采用细胞免疫荧光、Western blotting和血凝试验分别对表达的蛋白进行抗原性和生物活性分析.结果 在昆虫细胞中成功表达禽流感病毒重组his-H5蛋白,其相对分子质量约为64 000,与豚鼠红细胞能够发生凝集反应,免疫荧光与Western blotting结果提示该重组蛋白能够与禽流感病毒H5标准血清中的抗体特异性结合.结论 经杆状病毒-昆虫细胞表达系统获得的重组his-H5抗原具备天然的生物活性和抗原性,该方法为进一步研究禽流感病毒血凝素抗原生物学特性以及制备亚单位疫苗、相关抗体奠定了基础.

关键词：禽流感病毒、血凝素抗原、杆状病毒、昆虫细胞

所属期刊栏目：27

分类号：R373.9;R392.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：广东省科技厅科技计划2005B31201007

在线出版日期：2007-04-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：20-23