植物雌激素大豆黄酮对牛乳腺上皮细胞增殖及细胞周期的影响

摘要：

本试验采用大豆黄酮(DZ)作用于牛乳腺上皮MAC-T细胞,探讨其通过上调雌激素受体β(ERβ)表达对细胞体外增殖及细胞周期的影响,为DZ改善乳腺发育提供依据.采用不同浓度DZ(0～160.0 μmol/L)处理MAC-T细胞24 h,通过检测细胞活力确定DZ作用浓度;然后采用不同浓度DZ(0、2.5、5.0和10.0 μmol/L)处理MAC-T细胞12、24、36和48 h,通过检测细胞活力确定DZ作用时间;再用生理剂量的雌二醇(E2)作为阳性对照,对各处理细胞进行细胞计数,采用Western blot分析细胞内细胞周期相关蛋白、ERβ蛋白相对表达量,并用流式细胞技术分析细胞周期变化.结果表明:1)与对照组相比,2.5和5.0 μmol/L DZ处理细胞均能提高MAC-T细胞活力,其中5.0 μmol/L DZ处理显著提高细胞活力(P＜0.05);而在浓度高于10.0 μmol/L后,细胞活力均有下降,因此确定了 DZ作用的低、中和高浓度分别为2.5、5.0和10.0 μmol/L;而与对照组相比,处理12 h后,5.0 μmol/L DZ处理使得细胞活力显著提高(P＜0.05),其他2个浓度处理对细胞活力无显著影响(P＞0.05),因此确认DZ作用时间为12 h.2)与对照组相比,5.0 μmol/L DZ处理使得细胞数量显著增加(P＜0.05);2.5 μmol/L DZ处理使得细胞数量有所增加,但差异不显著(P＞0.05);E2处理使得细胞数量略低于各DZ处理,但差异不显著(P＞0.05).3)Western blot结果显示,与对照组相比,3个浓度DZ处理均可上调增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白Dl(CyclinD1)、细胞周期蛋白D3(CyclinD3)和ERβ的蛋白相对表达量,其中5.0 μmol/L DZ处理显著上调PCNA、CyclinD1和ERβ的蛋白相对表达量(P＜0.05).4)与对照组相比,5.0 μmol/L DZ处理极显著提高了 G2-M期细胞占比(P＜0.01),同时极显著提高了 S期细胞占比(P＜0.01);E2处理与5.0 μmol/L DZ处理趋势相同,均极显著提高了 G2-M期细胞占比(P＜0.01),同时提高了 S期细胞占比(P＞0.05).结果提示,植物雌激素DZ具有类雌激素样作用,可通过上调ERβ蛋白表达,提高G2-M细胞占比,阻滞细胞周期在S期,从而促进乳腺细胞的增殖.

关键词：MAC-T细胞、植物雌激素、大豆黄酮、细胞增殖、细胞周期

所属期刊栏目：34

分类号：S816(普通畜牧学)

资助基金：国家自然科学基金31972640

在线出版日期：2022-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：2645-2653