灵芝多糖对大肠杆菌感染IPEC⁃1细胞免疫功能的影响

摘要：

本试验旨在探究灵芝多糖对IPEC?1细胞增殖、周期和免疫功能的影响,为灵芝多糖在仔猪肠道健康方面的应用提供理论依据.试验分为空白组和不同浓度(5、10、20、50、100、200、400和800μg/mL)灵芝多糖组,CCK?8法检测IPEC?1细胞活力,利用PI染色和流式细胞仪检测灵芝多糖对IPEC?1细胞周期的影响.利用肠出血性大肠杆菌(EHEC)构建的IPEC?1细胞炎症模型,设空白组、EHEC组以及不同浓度(5、10、20、50和100μg/mL)灵芝多糖+EHEC组,测定灵芝多糖处理IPEC?1细胞后对EHEC的抑菌活性;通过酶联免疫吸附测定(ELISA)技术检测IPEC?1细胞上清液中白细胞介素-6(IL?6)、白细胞介素-1β(IL?1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF?α)、干扰素-γ(IFN?γ)和白细胞介素-10(IL?10)的分泌量;荧光定量PCR技术检测IPEC?1细胞中IL?6、IL?1β、TNF?α和IL?10 mRNA相对表达量.结果显示:1)与空白组相比,灵芝多糖作用IPEEC?1细胞48 h后细胞活力下降,且24 h时细胞活力优于12 h时,故选择24 h作为最佳作用时间.灵芝多糖作用24 h,浓度为5～100μg/mL时细胞活力优于浓度为200～800μg/mL时.2)5、10、20、50和100μg/mL灵芝多糖可显著抑制EHEC的增殖;50和100μg/mL的灵芝多糖处理IPEC?1细胞24 h,显著提高细胞抗EHEC活性(P<0.05).3)与空白组相比,EHEC组的IL?1β、IL?6和IFN?γ分泌量显著上升(P<0.05),IL?10分泌量显著下降(P<0.05);与EHEC组相比,5、10、20、50和100μg/mL灵芝多糖+EHEC组的IL?6、TNF?α和IFN?γ分泌量显著降低(P<0.05),20、50和100μg/mL灵芝多糖+EHEC组的IL?1β分泌量显著降低(P<0.05),5和50μg/mL灵芝多糖+EHEC组IL?10分泌量显著上升(P<0.05).4)与空白组相比,EHEC组的IL?1β和TNF?αmRNA相对表达量显著上升(P<0.05);与EHEC组相比,50和100μg/mL灵芝多糖+EHEC组IL?1βmRNA相对表达量显著下降(P<0.05).由上述结果可知,灵芝多糖能抑制大肠杆菌的增殖,缓解IPEC?1细胞的炎症反应,增强细胞的免疫功能.

关键词：灵芝多糖;IPEC-1细胞;大肠杆菌;细胞因子

所属期刊栏目：33

分类号：S811.3(普通畜牧学)

资助基金：福建省自然科学基金;福建省教育厅科技类项目

在线出版日期：2022-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共13页

页码：7118-7130