产γ－氨基丁酸屎肠球菌的筛选及γ－氨基丁酸的定量

摘要：

本试验旨在利用分子生物学方法鉴定分离得到1株产γ－氨基丁酸（ GABA）屎肠球菌，并定量测定所产GABA的量。从泡菜、酸奶、土壤、新鲜牛奶样品中筛选出一目标菌株F6，进行形态学特征与革兰氏染色鉴定；再扩增菌株F6的16S rDNA基因，然后测定该基因序列和构建系统发育树；同时采用高效液相色谱（ HPLC）法定量测定菌株F6发酵液中的GABA含量。结果表明：菌株F6菌落大而光滑、圆形、直径1～2 mm、边缘整齐、乳白色；在分离培养基上菌落周围形成透明圈，使分离培养基呈黄色；在MRS固体培养基上菌落不透明，周围有透明圈。革兰氏染色鉴定菌株F6为阳性菌。分子生物学鉴定分析显示，菌株 F6的16S rDNA 基因序列与GenBank数据库中屎肠球菌（ Enterococcus faecium）的相似性大于99％。 HPLC法测定得到GA?BA标准曲线线性方程为Y＝7080733．1395X－4511．6927（R2＝0．9994），通过方程得出菌株F6发酵液中的GABA含量为7．1 g／L，保留时间为7～10 min。结果提示，本试验筛选得到1株高产GABA的屎肠球菌F6。

关键词：屎肠球菌、γ-氨基丁酸、16S rDNA基因序列、高效液相色谱法定量、筛选

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分类号：S816.7(普通畜牧学)

资助基金：安徽高校自然科学研究项目计划 KJ2015A247；宿迁市农业科技支撑项目 L201405；宿迁市产业发展引导资金项目M201512

在线出版日期：2016-08-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：2504-2511