二硝基氯苯抑制硫氧还蛋白还原酶活性诱导的细胞氧化损伤模型的建立

摘要：

本试验旨在利用硫氧还蛋白还原酶( thioredoxin reductase,TrxR)的抑制剂二硝基氯苯( dinitrochlorobenzene,DNCB)作为刺激源,以细胞增殖率、TrxR活性和抗氧化指标作为判断依据,建立奶牛乳腺上皮细胞( bovine mammary epithelial cells,BMEC)的氧化损伤模型. 试验分2部分进行. 试验1采用单因子完全随机试验设计,将第3代的BMEC随机分为35组,每组8个重复. 培养液中分别添加0(对照)、10、30、50、100、300和500 μmol/L的DNCB,使之分别作用细胞2、4、6、8和12 h,通过检测细胞增殖率,初步确定适宜的作用时间;试验2在试验1得出适宜DNCB作用时间的基础上,采用单因子随机试验设计,将BMEC随机分为7组,每组6个重复,培养液中分别添加0 (对照)、10、30、50、100、300 和500 μmol/L 的 DNCB,通过检测细胞TrxR活性以及抗氧化指标,筛选出适宜的 DNCB 处理浓度. 结果表明,与对照组相比, 300 μmol/L DNCB作用2 h对BMEC产生了明显的氧化应激,细胞增殖率降到73.31%,TrxR活性降至56.23%,谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性也显著降低( P<0.05) ,丙二醛含量显著提高( P<0.05). 结果提示,300 μmol/L的DNCB作用浓度和2 h的作用时间可作为建立细胞氧化损伤模型的适宜剂量与作用时间.

关键词：奶牛乳腺上皮细胞、二硝基氯苯、氧化损伤模型

所属期刊栏目：27

分类号：S826(家畜)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31160466;"十二五"农村领域国家科技计划课题2012BAD12B09-03

在线出版日期：2016-02-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：3984-3990