奶牛乳腺上皮细胞系的培养与鉴定

摘要：

本试验旨在培养功能性奶牛乳腺上皮细胞系，为奶牛泌乳调控和奶牛乳房炎发病机制研究提供功能性的细胞模型。采用组织块细胞培养法来分离纯化并鉴定奶牛乳腺上皮细胞；采用有限稀释法单克隆奶牛乳腺上皮细胞；采用噻唑蓝( MTT)法来分析奶牛乳腺上皮细胞的生长曲线是否为正常的“S”形；观察细胞角蛋白18免疫荧光来证明所培养的细胞为上皮型；选择培养至10和20代的奶牛乳腺上皮细胞进行染色体核型分析。结果表明：1)利用组织块细胞分离法能够成功获得奶牛乳腺上皮细胞并传至20代。2)培养5~6 d成纤维细胞迅速增殖且周围分裂出少量的上皮细胞。培养8d奶牛乳腺上皮细胞迅速增殖，形成岛屿状集落，呈单层“鹅卵石”和“铺路石”形态生长。3)奶牛乳腺上皮细胞角蛋白18鉴定为阳性。4)培养至10和20代的奶牛乳腺上皮细胞染色体数为60条，具有正常的细胞二倍体核型。综上所述，采用组织块培养细胞能够获得具有稳定性、功能性的奶牛乳腺上皮细胞，但不是永生化细胞。

关键词：奶牛乳腺上皮细胞、乳房炎、功能性、核型分析

分类号：S823(家畜)

资助基金：江苏省高校优势学科建设工作资助项目

在线出版日期：2015-09-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2544-2550