牛环形泰勒虫烯醇化酶重组蛋白对小鼠免疫应答的研究

摘要：

为了评估牛环形泰勒虫(Theileria anmulata)烯醇化酶(enolase)原核重组蛋白对实验动物体液免疫水平和细胞免疫水平的影响,用His纯化柱和超滤管对pET-32a-enolase进行纯化和浓缩,应用West-ern blot分析蛋白的反应原性;另外利用牛环形泰勒虫烯醇化酶重组蛋白(rTa-enolase)免疫Balb/c鼠制备多克隆抗体,经间接ELISA检测血清中重组蛋白的特异性抗体水平.免疫后,取小鼠脾脏制备淋巴细胞悬液,用流式细胞术检测脾脏T细胞亚群情况;用MTT试剂盒检测体外刺激后T淋巴细胞增殖情况;用Spss ANOVA单因素检验进行差异显著性分析.Western blot表明,enolase重组蛋白可与阳性血清发生特异性反应.ELISA检测免疫鼠特异性IgG/IgG1和IgG2a抗体均与对照组差异极显著(P＜0.01);流式细胞术检测表明,免疫组(2.53±0.11)与对照组(1.85±0.11)CD4+/CD8+T细胞的比值差异极显著(P＜0.01);用rTa-enolase重组蛋白刺激小鼠脾脏淋巴细胞后明显促进其增殖(P＜0.05).研究结果表明rTa-enolase免疫小鼠能够诱导小鼠产生极高的体液免疫水平以及细胞免疫应答水平,细胞免疫应答偏向于CD4+T细胞,为后续其在疫苗中的免疫功能提供数据资料.

关键词：牛环形泰勒虫、烯醇化酶、特异性抗体水平、CD4+T细胞

所属期刊栏目：45

分类号：S852.723;S852.42(动物医学（兽医学）)

资助基金：新疆维吾尔自治区区域协同创新专项项目2021E01001

在线出版日期：2024-02-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：24-29