基于0507蛋白的山羊支原体山羊肺炎亚种抗体间接ELISA检测方法的建立

摘要：

为建立山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp)抗体检测方法,对Mccp的0507基因进行克隆与载体构建,通过原核表达技术制备重组0507蛋白,建立Mccp抗体间接ELISA检测方法,验证该方法的特异性、灵敏性与重复性,并对临床收集的血清样品进行检测.结果显示,重组0507蛋白大小为39 ku,Western blot证明重组0507蛋白具有良好的反应原性;建立的ELISA检测方法抗原包被量为3 μg/mL,血清稀释倍数为1∶200,酶标二抗稀释倍数为1∶2 500,阴阳临界值为0.221.用该方法对山羊流产衣原体、立克次氏体与牛支原体的阳性血清进行检测,结果均为阴性;Mccp阳性血清最大稀释倍数为1 024倍;批内、批间变异系数均小于10％.对陕西省部分羊场收集到的282份血清进行检测,Mccp阳性率为13.1％.该研究建立了一种检测Mccp抗体间接ELISA检测方法,为Mccp的实验室诊断和流行病学调查提供了技术支持.

关键词：山羊支原体山羊肺炎亚种、0507蛋白、酶联免疫吸附试验、抗体检测

所属期刊栏目：44

分类号：S852.62(动物医学（兽医学）)

资助基金：陕西省重点研发计划重点项目;秦巴山区奶山羊产业示范项目

在线出版日期：2023-10-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

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