牛病毒性腹泻病毒NS5A蛋白纳米抗体的筛选与鉴定

摘要：

为防控牛病毒性腹泻的流行,淘选得到抗BVDV-NS5 A的纳米抗体序列,并探究其结合活性.通过重组质粒pET30a-NS5A诱导表达并纯化蛋白,免疫羊驼,获得重组质粒pCANTAB 5E-VHH,构建了一个初始的抗BVDV-NS5 A纳米抗体展示文库.利用3轮固相亲和筛选,对筛选后的单克隆抗体通过ELISA验证其特异性与结合力并测序、分析.构建出具有较好多样性的噬菌体展示文库,测得库容为5.3×107 CFU/mL,插入率73.9％.通过评价和分析显示,得到20株不同氨基酸序列的纳米抗体,其中7株与NS5 A蛋白具有较好反应性.针对抗BVDV-NS5 A蛋白淘选纳米抗体,并证明得到的纳米抗体有较好的结合力.研究结果有望用于研发BVDV诊断试剂盒、抗BVDV的候选药物,同时也为后续BVDV的致病机制研究奠定了基础.

关键词：牛病毒性腹泻病毒、NS5 A蛋白、纳米抗体

所属期刊栏目：44

分类号：S852.653;S858.23(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31960691

在线出版日期：2023-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1-6