10.3969/j.issn.1007-5038.2023.04.001
牛病毒性腹泻病毒NS5A蛋白纳米抗体的筛选与鉴定
为防控牛病毒性腹泻的流行,淘选得到抗BVDV-NS5 A的纳米抗体序列,并探究其结合活性.通过重组质粒pET30a-NS5A诱导表达并纯化蛋白,免疫羊驼,获得重组质粒pCANTAB 5E-VHH,构建了一个初始的抗BVDV-NS5 A纳米抗体展示文库.利用3轮固相亲和筛选,对筛选后的单克隆抗体通过ELISA验证其特异性与结合力并测序、分析.构建出具有较好多样性的噬菌体展示文库,测得库容为5.3×107 CFU/mL,插入率73.9%.通过评价和分析显示,得到20株不同氨基酸序列的纳米抗体,其中7株与NS5 A蛋白具有较好反应性.针对抗BVDV-NS5 A蛋白淘选纳米抗体,并证明得到的纳米抗体有较好的结合力.研究结果有望用于研发BVDV诊断试剂盒、抗BVDV的候选药物,同时也为后续BVDV的致病机制研究奠定了基础.
牛病毒性腹泻病毒、NS5 A蛋白、纳米抗体
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S852.653;S858.23(动物医学(兽医学))
国家自然科学基金31960691
2023-04-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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