非洲猪瘟病毒I177L蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

摘要：

为了制备抗非洲猪瘟病毒I177L蛋白的多克隆抗体,根据HLJ/2018株的I177L序列,设计引物,扩增带有His标签序列的I177L序列,并将其插入pMAL-c5x原核表达载体中,转化至Rosetta(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达和切胶纯化后,用Xa蛋白酶因子去除重组蛋白中的MBP标签.将处理后的I177L蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体.结果显示,在 37℃、0.6 mmol/L IPTG条件下,诱导5 h后,重组MBP-I177L蛋白表达量最高,蛋白分子质量大小约为67 ku,与预期大小相符;重组蛋白以可溶性表达为主;多克隆抗体经Western blot、间接ELISA及IFA试验结果显示,抗体效价为1 ∶128000,并且该抗体能特异性识别I177L蛋白.

关键词：非洲猪瘟病毒、I177L蛋白、原核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：44

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：广东省重点领域研发计划项目;佛山科学技术学院横向合作项目

在线出版日期：2023-04-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：8-14